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基质胶matrigel matrix操作注意事项

发布日期:2016-10-28字号调整14px浏览次数(348)
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  基质胶matrigel matrix操作注意事项 

    鉴于基质胶的操作环境要求比较严格,为保证您的实验顺利,河南省人民医院中心实验室特此对以下几个方面进行温馨提示:

    1.  收货时,首先确认还有干冰,matrigel matrix成固态,液面水平;

    2.  整个matrigel matrix只能分装一次,在分装前,要先放在4℃冰箱(最好先把matrigel matrix插在冰上,然后放入4℃冰箱)一段时间待之融化(切记不要放在冰箱门上或者是经常要敞开口取放试剂的冰箱),且分装用的枪头、EP管等都要提前-20℃预冷(因为基质胶在10℃以上即会发生成胶凝固导致基质胶报废),整个分装过程要在冰上进行,且以后每次实验时拿出本次用量的已经分装好的基质胶用,该次实验用不完的基质胶要扔掉,不可以留作下次使用;

    3.  实验人员的手心不要接触基质胶,如:要手持装有matrigel matrix的EP管的上方,防止体温使基质胶成胶凝固;

    4.  普通matrigel matrix的浓度是8-12mg/ml,高浓度的matrigel matrix的浓度是18-22mg/ml,具体浓度可通过货号查询;

    5.  以24孔板为例,做肿瘤细胞侵袭实验时每孔加入matrigel matrix 20-30ug(一般配成200-300ug/ml 的工作浓度,然后每孔加入100ul即可)。此时,matrigel matrix是稀释到很低的倍数(有的实验需要低至30倍稀释,具体最适浓度需根据自己的实验进行优化)。铺胶后置于37℃培养箱放置1小时,取出后如果上层有液态培养基,需小心弃去上层的液态培养基即可使用(此时matrigel matrix沉在底部形成一小薄层);

    6.  做内皮细胞的成管实验一般把高浓度的matrigel matrix(18-22mg/ml)稀释到10mg/ml,由于普通浓度的matrigel matrix(8-12mg/ml)的浓度接近10mg/ml,所以有时也可用作成管实验;

    7.  应使用传代次数较少、状态良好的细胞进行实验;

    8.  以上内容非常重要,请务必重视。

 

 

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