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利用流式细胞仪对淋巴细胞亚群进行绝对值计数

时间:2015-12-16

利用流式细胞术测定淋巴细胞亚群绝对值,现行方法主要有两种分为:双平台方法和单平台方法。

双平台方法:顾名思义计数结果来源于流式细胞仪和第二种仪器(通常为血细胞分析仪)。流式细胞仪用于获取淋巴细胞群中的目的细胞亚群的比例。用血细胞分析仪分析同一标本靶细胞群的绝对数。这两个测定结果相乘所得即为目的细胞群的绝对数。双平台法即先用血细胞分析仪检测白细胞的绝对值,再乘以流式细胞仪测定的淋巴细胞亚群的比例,即可得到淋巴细胞的绝对值。淋巴细胞的绝对值乘以流式细胞仪测得的各种亚群比例,可得到各种亚群的绝对值。注意事项:白细胞计数需要与亚群分析使用同一标本进行测试, 并在6h内完成。 

单平台方法:用于流式细胞术测定淋巴细胞亚群绝对值的一种方法,所有结果均来自流式细胞仪一台仪器。单平台方法有两种,一种为能够精确上机体积的负压流式细胞仪。负压吸样容易产生气泡,有时计数不会太准确。当前,主流的流式细胞仪均为正压吸样。所以,这种流式绝对值计数开展较少。另一种为通过流式细胞仪检测测定管中已知浓度的荧光微球,间接计算出淋巴亚群中各种亚群的绝对值。这种方法商品化的试剂很多,可以参照生产厂商的说明书进行操作。 

建议,流式细胞仪进行绝对值计数,单平台方法是首选,它减轻了室间变异并避免了多台仪器间的系统误差。在单平台方法中推荐第二种,定量荧光微球法。相对来说,这种方法较为普遍,也较为精准。

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